sexta-feira, 2 de janeiro de 2009

Como embalar material (kit de manipulação de cogumelo/esporo) para esterilizar

Material a providenciar para o kit:


- tesoura com ponta (preferível a cirúrgica pequena ou de tira pontos);
-pirex de louça ou tampa de quentinha metálica;
-estilete caseiro com ponta ou bisturi de lâmina nº 11,
-um arame 20 cm x 0,8 mm ou 1,00mm;
-um palito tipo espetinho de churrasquinho (metade) com fio de arame (5cm) bem fino (0,02mm) amarrado em sua ponta (pode ser fio de cobre dobrada ao meio) sendo que a parte dobrada fique uma pequena argola na ponta (arame de argola na ponta) ;
-pinça anatômica sem dente;

Material para embalar:
-1 rolo de folha de alumínio;
-papel pardo ou folha de jornal tipo publicitária (encharca menos);
-rolo de fita crepe
-panela de pressão (preferível de 20 litros ou mais) ou um autoclave.







Estilete caseiro feito palito (tipo picolé = espátula de madeira) e um pedaço de lâmina de barbear.
Ao construir tenha cuidado para não se ferir.
Tem de abrir uma fenda na ponta do palito onde a lâmina será inserida. E depois enrole arame fino em vota, para firmar a lâmina.


Se não adquira um bisturi(cabo vem separado) e as Lâminas tem enumerações conforme tamanho e formato) . Consiga a lâmina para bisturi nº 11. Vai precisar também de pinça porta Lâmina, para colocar lâmina no cabo do bisturi.


Peça à alguém do hospital ou Posto para lhe mostrar, como montar lâmina de bisturi no cabo, sem se machucar.








Antes de embalar co papel para ir à esterilização. ponha algo para proteger a ponta, para não perfurar o pacote, e contaminar a lâmina ou ferir-se no manuseio dos pacotes.









Arame inoculadora.
Costrua com um palito tipo churrasquinho e um padacinho de arame ou fio de cobre dobrada ao meio, enrole na ponta do palito (cortado ao tamanho + ou- 20cm).
Se não for ao kit de esterilização de flambar em cada uso 30 segundos antes. tem que esperar esfriar antes de tocar na colônia, caso contrário queima esporo e não cresce nada na cultura semeada.







Rolo de folha de alumínio é útil para tampar vidrarias com gel de cultura.
Saco de plástico, tipo freezer/micro-ondas, também.
Argolas de elástico, para tampar frascos com vidrarias de meio de cultura ágar/gel
















Dobre de um jeito que na hora de abrir possa abrir fácil, puxando só pelas pontas.


















Quando fechar com folha de alumínio, embrulhe ainda com folha de papel (pardo ou jornal publicitária).
Então, está pronto para ir ao autoclave ou panela de pressão; para esterilizar (podendo ser 15min. Chiando e não 30min. Como no caso de material hospitalar). Estes não poderão ser usadas em cirurgia porque vírus da hepatite só morre se submetida à 120ºC por mais de 20 min.
Aqui iremos só manipular cogumelos, e não necessita esterilizar tanto tempo. É gasto desnecessário de energia (gás de cozinha).

Se não for esterilizado em pacotes/kits, faça flambagem ao fogo imediatamente, antes a qualquer manipulação (só aguarde + ou – 20 segundos para esfriar).
Flambagem é só passar no fogo + ou – 3 segundos, cada lado, e não precisa ficar muito quente a ponto de o metal começar a ficar vermelho.








Chama de uma vela =deixa fuligem preta, que não é esteticamente bonito, mas é funcional. Mas deixa mancha preta em certas situações, e se não se acostumar pode confundir-se com uma contaminação.












Bico de Bunzen (=chama a gás) não deixa fuligem preta nos materiais flambados.Imagem copiadada da internet.





Para esterilização em panela de pressão:












Pode aproveitar uma tampa velha de panela, furá-lo e usar como suporte aramado do fundo. Esta imagem foi copiada da internet.











Aprovetar latinhas de sardinha e tampas de vidro como pés do suporte aramado.











Depois de montado o fundo coloque água 2 ou 3 cm, sem que o suporte fique mergulhado.
Esta imagem foi copiada da internet.





Latinhas vazias de sardinhas e atum + tampas de conserva metálicas no fundo, para servirem como pés. As tampas metálicas fazem barulhos, durante a fervura, e quando secar água, irá deixar de ouvir esse barulho. Com tempo vai saber exatamente, quanto de água colocar, para secar exatamente aos 30 min. de chiado. Ideal para secarem o material no ponto.(para panela de 25 L coloco 500ml e fogo é de gás em fogareiro de chão para caldeirões)
Os pacotinhos (kits etc...) precisam ir à local seco e quente, para secarem bem. Já os vidros com gel de cultura precisam (principalmente os vidrinhos pequenos e tubos de ensaio) em superfície inclinada à +ou- 45º G. Por isso, os frasquinhos dentro de uma caixa metálica como quentinha (marmita) é bem util. É só pegar a caixa, ainda quente e levar para um local (bancada) e calçar um objeto por baixo de só um dos lados, para que o gel endureça inclinado.
Porque do gel inclinado?
É porque se durante a incubação da cultura, formar líquidos de condensação nos lados do vidro, irá escorrer para fundo inclinado e não afogará totalmente as hifas (micélio) dos cogumelos. Se ficarem muito encharcados, as hifas tendem a crescer só em glóbulos e não em prolongamentos (pelinhos brancos=hifas). Não que isso seja ruim, mas dificulta saber se aquelas colônias globulares são do cogumelo em questão, ou de algum contaminante de bactérias.
Quando aparecer contaminante, se ficarem + ou – afastados, uma colônia da outra, podemos escolher só aquela colônia de hifas brancas (tocando com arame, somente nela) para semear um novo frasco de cultura, a fim de ter colônia pura, só daquele cogumelo que se quer.
Isso se chama técnica de isolamento e purificação.
Se mesmo sendo uma colônia de glóbulos daquele cogumelo que se quer, se estiverem mais ou menos afastados da outra contaminante, podemos fazer o mesmo processo.
Se estiver encharcado de mais e tudo nadando, não poderíamos identificar, qual é quem, ou em algumas vezes se houve ou não contaminação, por alguns serem muito parecidos uma da outra.











Compre e venda produtos novos e usados





Nenhum comentário:

Postar um comentário

Bem vindos!
Por favor, deixe seu comentário.